فرخ کریمی مندل بسر

انتخاب روش مناسب برای انتقال کاستهای ژنی به درون سلولهای یوکاریوتیک یکی از چالشهای مهم در توسعه تحقیقات و درمان سرطان است. سیستم ژنرسانی به درون سلولهاییوکاریوتی باید بهگونهای باشد که در عین کارایی باال کمترین سمیت و مرگ را برای سلول داشته باشد. یکی از روشهای رایج ژنرسانی روش الکتروپوریشن بوده که به منظور انتقال کاست ژنی یوکاریوتی به درون سلولهای جانوری مورد استفاده قرار میگیرد. در پژوهش حاضر برخی از فاکتورهای تاثیرگذار در کارایی الکتروپوریشن مثل ظرفیت خازن، مقاومت و غلظت پالسمید بررسی و بهینهسازی شد. به این منظور کاست ژنی حاوی ژن گزارشگرGFPsparkپس از استخراج و تخلیص با روش رایج الکتروپوریشن به رده سلولهای سرطانی معدهAGSترنسفکت شد. نتایج ترنسفکت نشان داد که بیان ژنGFPدر شرایط960 میکروفاراد و مقاومت∞در غلظت15میکروگرم پالسمید در رده سلولهایAGSازکارایی باالیی برخوردار است.