مشخصات پژوهش

عنوان	بهینه سازی تولید آنزیم آسپاراژیناز به عنوان یک داروی ضد سرطان در مخمر یارروویا لیپولیتیکا
نوع پژوهش	طرح پژوهشی خاتمه یافته
کلیدواژه‌ها	آسپاراژیناز، یارروویا لیپولیتیکا، تولید، بهینه سازی، دارو ضد سرطان
چکیده	ال- آسپاراژیناز، آنزیمی است که واکنش آبکافت ال- آسپاراژین به اسید ال- آسپاراتیک و آمونیاک را تسریع می نماید. این آنزیم در درمان بیماران مبتلا به لوسمی لنفوبلاستیک حاد، انواع ملانوسارکوما و لنفوسارکوما استفاده می شود. تولید آسپاراژیناز جدید با منشا یوکاریوتی و اثرات جانبی کمتر هدف این تحقیق بود. ‎ ‎ تولید کیفی و کمی آسپاراژیناز در چهار سویه ی مخمر یارروویا لیپولیتیکا DSM 3286‎ ، DSM 3218‎ و DSM 70562‎، CBS 6303‎ مورد بررسی قرار گرفت. ارزیابی کیفی با محیط مینی مال آسپاراژین آگار انجام شد. هر چهار سویه با ایجاد هاله ی ارغوانی رنگ در اطراف کلنی نشان دادند قادر به تولید آنزیم آسپاراژیناز هستند. سویه DSM 3286‎ مخمر یارروویا لیپولیتیکا بیشترین قطر هاله را داشت. بررسی کمی تولید آنزیم آسپاراژیناز در محیط سیزپکس داکس انجام شد و میزان فعالیت آنزیم بر اساس آمونیاک آزاد شده با معرف نسلر تعیین گردید. سویه های DSM 3286‎ ، DSM 3218‎ و DSM 70562‎، CBS 6303‎ به ترتیب 14/17، 98/6، 11 و 61/5 واحد در میلی لیتر آسپاراژیناز بعد از 24 ساعت تولید کردند. سویه DSM ‎‎3286‎ با تولید بیشترین مقدار آنزیم آسپاراژیناز به عنوان سویه برتر انتخاب شد. روش طراحی آزمایش تاگوچی برای بهینه سازی تولید آنزیم آسپاراژیناز استفاده شد که تولید به 22/62 واحد در میلی لیتر رسید. سپس برای بهینه سازی بهتر تولید آنزیم آسپاراژیناز روش طراحی آزمایش پاسخ سطح به کار رفت که مقدار تولید به 85/102 واحد در میلی لیتر پس از بهینه سازی رسید. شرایط بهینه برای تولید آسپاراژیناز در بیوراکتور مورد استفاده قرار گرفت. تولید آنزیم به 210 واحد در میلی لیتر در بیوراکتور رسید که 12 و 2 برابر بیش از شرایط غیر بهینه و بهینه شده بود. مخمر یارروویا لیپولیتیکا می تواند به عنوان منبع بالقوه تولید ال- آسپاراژیناز باشد. از فعالیت بالای آنزیمی این مخمر می توان جهت دست یابی به آسپاراژینازی با خصوصیات درمانی ایده آل تر در درمان بیماران مبتلا به سرطان استفاده کرد.
پژوهشگران	فرشته شمسی (نفر دوم)، فرشاد درویشی هرزویلی (نفر اول)